人β干扰素-血清白蛋白融合蛋白在毕赤酵母中的分泌表达
利用重叠PCR技术在体外拼接IFNβ和HSA基因,将得到的融合基因插入到毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K中,置于启动子AOX1和α交配因子信号肽的作用下,分泌表达融合蛋白IFNβ-HSA.重组质粒pPIC9K-IFNβ-HSA经SalI线性化,电击转化毕赤酵母KM71,经G418筛选得到高拷贝转化子.PCR鉴定后,用甲醇诱导表达,SDS-PAGE和Western blot分析表达的融合蛋白IFNβ-HSA,表明该蛋白分子量约为90kDa,且具有HSA的抗原性;用细胞病变抑制法测定发酵液上清中融合蛋白的干扰素活性约为640IU/ml.
作 者： 作者单位： 刊 名： 中国生物工程杂志 ISTIC PKU 英文刊名： CHINA BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)： 2006 26(7) 分类号： Q786 关键词： β干扰素 巴斯德毕赤酵母 融合蛋白