一种新型的琼脂糖疏水层析介质开发及其在重组乙肝表面抗原(CHO-HBsAg)分离纯化中的应用
以粒径均一的国产高交联度快速流琼脂糖为基质,采用活化、交联等步骤合成了针对分离纯化CHO-HBsAg的3C间臂的丁基琼脂糖疏水介质,通过控制丁基配基密度提高分离HBsAg的纯化倍数和回收率,获得了纯化倍数约20、HBsAg回收率约80%的介质.评估了合成介质的理化性质,流速为500cm/h时柱压力小于0.06MPa,表明介质具有较高的机械强度和良好的流动性能,介质经过酸、碱、变性剂等处理后化学性质稳定.将介质合成工艺进一步放大到2L介质/批,应用到HBsAg分离纯化的三步层析整和工艺中,结果表明,批量合成的疏水介质,HBsAg回收率与进口介质相当,HBsAg终产品纯度在95%以上,符合国家药典要求.最后考察了介质合成批次间的配基密度的可控性和单批次合成介质的重复使用性,结果表明,合成工艺和介质的重复性能满足产业化要求,这种成本低的介质有望替代目前工业生产广泛使用的进口疏水介质.
作 者： 王阳木 闭静秀 赵岚 周卫斌 李岩 黄永东 张焱 林海 苏志国 WANG Yang-Mu BI Jing-Xiu ZHAO Lan ZHOU Wei-Bin LI Yan HUANG Yong-Dong ZHANG Yan LIN Hai SU Zhi-Guo 作者单位： 王阳木,WANG Yang-Mu(北京科技大学土木与环境工程学院,北京,100083;中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室,北京,100080)闭静秀,赵岚,周卫斌,李岩,黄永东,张焱,苏志国,BI Jing-Xiu,ZHAO Lan,ZHOU Wei-Bin,LI Yan,HUANG Yong-Dong,ZHANG Yan,SU Zhi-Guo(中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室,北京,100080)
林海,LIN Hai(北京科技大学土木与环境工程学院,北京,100083)
刊 名： 生物工程学报 ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)： 2006 22(2) 分类号： Q939.91 关键词： 疏水作用层析 层析介质 重组乙肝病毒表面抗原 纯化