人血管内皮抑制素在毕赤酵母中的表达纯化及活性测定
血管内皮抑制素是胶原XⅧC-末端的一个片段,是有效的血管生成抑制因子.克隆了人血管内皮抑制素的基因,并用毕赤酵母进行表达,表达量为50.5 mg/L.发酵液上清经SPSepharose Fast Flow凝胶一步层析,产物纯度达到98%以上,纯化收率达到95%以上.毕赤酵母分泌表达的人血管内皮抑制素具有免疫活性,能明显抑制鸡胚尿囊膜新生血管的生长,并且能特异性地抑制bFGF刺激的人微血管内皮细胞的迁移,达到抑制效果为50%时所需的蛋白浓度(IC50)为O.4μg/ml.为应用人血管内皮抑制素治疗肿瘤奠定了初步实验基础.
作 者: 姚雪静 李壮林 常国栋 原桂勇 于学珍 YAO Xue-jing LI Zhuang-lin CHANG Guo-dong YUAN Gui-yong YU Xue-zhen 作者单位: 烟台麦得津生物工程股份有限公司,烟台,264006 刊 名: 中国生物工程杂志 ISTIC PKU 英文刊名: CHINA BIOTECHNOLOGY 年,卷(期): 2006 26(4) 分类号: Q789 关键词: 血管内皮抑制素 血管生成 毕赤酵母 纯化