蛇毒纤溶酶Alfimeprase在大肠杆菌中的可溶表达和纯化
Alfimeprase是Fibrolase的突变体,是一种蛇毒纤溶酶,有纤溶活性而无出血性.根据Alfimeprase的氨基酸序列和大肠杆菌密码子偏爱性,利用PCR的方法合成Alfimeprase DNA序列,分别融合在NusA和MBP的C端,与分子伴侣FkpA在大肠杆菌Origami B(DE3)中共表达,融合蛋白NusA/Alfimeprase以部分可溶的形式存在,可溶部分占上清总蛋白的25%左右,通过镍柱亲合层析纯化和肠激酶切割得到具有纤溶活性的重组蛋白Alfimeprase.首次报道在大肠杆菌中可溶表达Alfimeprase,为以后深入研究其功能及应用奠定了基础.
作 者： 张守涛 周雁胜 赖学华 包星峰 郭蔼光 ZHANG Shou-tao ZHOU Yan-sheng LAI Xue-hua BAO Xing-feng GUO Ai-guang 作者单位： 西北农林科技大学,生命科学学院,杨凌,712100 刊 名： 中国生物工程杂志 ISTIC PKU 英文刊名： CHINA BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)： 2006 26(3) 分类号： Q81 关键词： 蛇毒纤溶酶 分子伴侣 可溶性表达 纯化