人IGF-1在大肠杆菌中的可溶表达和纯化
目的:在大肠杆菌中的可溶表达和纯化人胰岛素样生长因子1(hIGF-1).方法:根据hIGF-1的氨基酸序列和大肠杆菌密码子偏爱性,利用重叠延伸PCR的方法合成hIGF-1 DNA序列,构建表达载体,在大肠杆菌Origami B(DE3)中与硫氧还蛋白Trx A融合表达,并通过盐析和镍柱亲合层析进行纯化.结果:SDS-PAGE分析显示,重组融合蛋白以可溶形式存在,分子量约为28 kDa,占上清总蛋白的50%以上.经盐析和镍柱亲合层析进行纯化,目标蛋白纯度可达到90%左右.结论:复合干扰素在大肠杆菌中的高效可溶表达.
作 者： 张守涛 梁会娟 张芸 作者单位： 张守涛(郑州大学生物工程系,河南郑州,450001)梁会娟,张芸(河南富邦药业有限公司,河南郑州,450001)
刊 名： 生物技术 PKU 英文刊名： BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)： 2010 20(2) 分类号： Q819 Q786 关键词： 人胰岛素样生长因子1 硫氧还蛋白 可溶表达 纯化 Higf-1 Trx A soluble expression purification