乳糖诱导大肠杆菌中重组谷氨酰胺合成酶的表达
以重组枯草芽孢杆菌谷氨酰胺合成酶(L-谷氨酸:氨连接酶,Glutamine Synthetase,GS EC 6.3.1.2)蛋白表达宿主菌株BL21(DE3) (pET3C/谷氨酰胺合成酶)作为研究对象,借助SDS-PAGE分析方法,对于用乳糖诱导由T7lac启动子控制的重组目的产物蛋白的表达规律进行了优化研究,分别比较了最佳诱导起始生长量、所需乳糖的浓度、诱导持续时间、补加乳糖和氨苄青霉素及不同培养基等参数对重组产物表达的影响.实验结果表明,对于T7lac启动子控制的重组目的产物,乳糖作为诱导剂也可以起到很好的诱导表达效果,诱导产物的表达量、可溶性及酶活与IPTG诱导产物基本接近.本研究结果为乳糖作为诱导剂应用于重组大肠杆菌谷氨酰胺合成酶工业化生产提供了一定的参考依据.
作 者： 刘俊红 刘顺谊 殷志敏 Liu Junhong Liu Shunyi Yin Zhimin 作者单位： 刘俊红,Liu Junhong(安徽师范大学生命科学学院,安徽,芜湖,241000;南京师范大学生命科学学院,江苏,南京,210097)刘顺谊,殷志敏,Liu Shunyi,Yin Zhimin(南京师范大学生命科学学院,江苏,南京,210097)
刊 名： 南京师大学报（自然科学版） ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF NANJING NORMAL UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE EDITION) 年，卷(期)： 2006 29(3) 分类号： Q78 关键词： 谷氨酰胺合成酶 原核表达 乳糖 IPTG