人白介素-3乳腺表达载体的构建
人白介素-3是一种造血系统和免疫系统调节剂,在治疗造血系统疾病、肿瘤、先天或获得性免疫功能缺陷等方面发挥着重要作用.应用牛乳腺生物反应器生产人白介素-3的研究具有重要的临床应用和经济价值.研究选用具有红色荧光蛋白报告基因(Red2)和新霉素抗性基因(neor)表达框架的pDsRed2-1质粒为骨架构建人白介素-3乳腺表达载体.通过PCR方法分别扩增牛β-酪蛋白基因5′端上游调控序列、人IL-3基因以及CMV启动子序列,将它们按先后顺序分别定向克隆于质粒pDsRed2-1的多克隆位点内,使牛β-酪蛋白基因调控序列位于人IL-3基因的上游,指导人IL-3基因在乳腺组织中特异性表达,而CMV启动子位于红荧光蛋白基因的上游,指导红荧光蛋白基因在所有的组织中非特异性表达.限制性酶切片段分析及部分DNA序列鉴定结果表明,所构建载体结构正确.
作 者： 多曙光 吴应积 罗奋华 旭日干 DUO Shu-guang WU Ying-ji LUO Fen-hua BOU Shorgan 作者单位： 内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室,呼和浩特,010021 刊 名： 内蒙古大学学报（自然科学版） ISTIC PKU 英文刊名： ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS NEIMONGOL 年，卷(期)： 2006 37(5) 分类号： Q819 关键词： 载体构建 牛β-酪蛋白基因启动子 人白介素-3基因