转基因白桦外源基因的多重PCR快速检测
根据转化的载体序列上T-DNA中的目的基因bt,选择性筛选标记基因nptⅡ和报告基因gus设计三对特异性引物,PCR产物片断大小分别为247 bp、449 bp、668 bp,应用多重PCR (mutiplex-PCR)的方法同步检测18株转基因白桦中三个基因的整合状况;用阳性对照为模板,对单重PCR(simplex-PCR)和多重PCR的各项指标进行比较.结果表明多重PCR检测多个外源基因在敏感性方面与单重PCR相比并没有减弱,而且略有提高;对18株样品的多重PCR同步检测无假阳性出现,结果准确,同时在操作中具有减少污染,缩短时间和节约成本等优点.因此,在对转基因白桦的外源基因的定期检测中,多重PCR是一种非常有效而便捷的方法,可以为转基因的拷贝数,T-DNA旁侧序列特征等转基因整合特性方面的研究提供数据.
作 者： 詹亚光 苏涛 韩梅 孙冬 ZHAN Ya-Guang SU Tao HAN Mei SUN Dong 作者单位： 詹亚光,苏涛,孙冬,ZHAN Ya-Guang,SU Tao,SUN Dong(东北林业大学生命科学学院,哈尔滨,150040)韩梅,HAN Mei(东北林业大学森林植物生态学教育部重点实验室,哈尔滨,150040)
刊 名： 植物研究 ISTIC PKU 英文刊名： BULLETIN OF BOTANICAL RESEARCH 年，卷(期)： 2006 26(4) 分类号： Q94 关键词： 白桦 外源基因 T-DNA 多重PCR