来源于Pyrococcus furiosus的耐高温α-淀粉酶基因在衣藻叶绿体中的表达
来源于Pyrococcus furiosus的耐高温α-淀粉酶是一种重要的酒精工业用酶,在植物中表达耐高温α-淀粉酶可以大大降低用植物秸秆生产酒精的成本.选择衣藻叶绿体基因组同源片段clpP-trnL-petB-chlL-rpl23-rpl2和壮观霉素抗性基因,构建了来源于Pyrococcus furiosus的耐高温α-淀粉酶基因的衣藻叶绿体表达载体p64A.通过基因枪将其导入衣藻叶绿体中,经壮观霉素抗性(100mg/L)筛选,获得了9个抗性衣藻转化子.转化子经过抗性继代筛选后,经PCR、Southern blot检测分析及暗培养,证实耐高温α-淀粉酶基因已整合到衣藻叶绿体基因组中并得到表达.酶活性检测表明,转基因衣藻表达产物具有耐高温α-淀粉酶活性,每克鲜重衣藻最高达77.5u.实验结果证明在植物叶绿体中表达工业酶制剂是可行的.
作 者： 杨宗岐 李轶女 张志芳 王勇 沈桂芳 YANG Zong-Qi LI Yi-Nü ZHANG Zhi-Fang WANG Yong SHEN Gui-Fang 作者单位： 杨宗岐,YANG Zong-Qi(南开大学生命科学学院,天津,300071;中国农业科学院生物技术研究所,北京,100081)李轶女,张志芳,沈桂芳,LI Yi-Nü,ZHANG Zhi-Fang,SHEN Gui-Fang(中国农业科学院生物技术研究所,北京,100081)
王勇,WANG Yong(南开大学生命科学学院,天津,300071)
刊 名： 生物工程学报 ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)： 2006 22(4) 分类号： Q786 关键词： Pyrococcus furiosus 耐高温α-淀粉酶 叶绿体表达 衣藻