BDNF基因重组逆转录病毒表达载体pLEGFP-BDNF的构建与鉴定
目的构建脑源性神经营养因子(BDNF)基因重组逆转录病毒表达载体.方法根据BDNF基因已知序列,设计合成一对引物并导入HindⅢ和BamH Ⅰ酶切位点;从大鼠海马组织提取总RNA,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)获得编码BDNF的基因片段,与克隆载体pMD 18-T Simple连接构建pMDT-BDNF质粒;经HindⅢ、BamH Ⅰ双酶切,获得BDNF基因片断再克隆至逆转录病毒载体pLEGFP-N1中构建重组质粒pLEGFP-BDNF.结果限制性内切酶酶切分析和PCR法鉴定表明为正确重组子,测序结果证实与已知序列吻合. 结论构建的重组逆转录病毒表达载体pLEGFP-BDNF含有序列正确的大鼠BDNF基因,可以作为今后治疗老年性痴呆动物模型转基因实验的基因来源.
作 者： 李佳楣 龙大宏 冷水龙 罗秀梅 黄文燕 宣爱国 LI Jia-mei LONG Da-hong LENG Shui-long LUO Xiu-mei HUANG Wen-yan XUAN Ai-guo 作者单位： 510182,广州,广州医学院人体解剖学教研室 刊 名： 中华神经医学杂志 ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF NEUROMEDICINE 年，卷(期)： 2006 5(5) 分类号： Q34 关键词： 脑源性神经营养因子 逆转录病毒载体 基因重组