木聚糖酶XYNB的N46D突变、表达及酶学性质变化
对来源于Streptomyces olivaceoviridis的高比活木聚糖酶XYNB进行同源建模和同源序列比较,发现第11族木聚糖酶的催化结构域在β折叠股A3和B3之间存的一个保守的氨基酸位点,该位点与木聚糖酶的pH特性有关.据此设计了XYNB的N46D定点突变.将突变酶XYNBN46D在毕赤酵母中表达,表达的XYNBN46D经纯化后与原酶XYNB(同样经毕赤酵母表达后纯化)进行酶学性质比较,结果表明,XYNBN46D的最适pH值由5.2下降到4.2,pH稳定性也向酸性pH偏移,同时,热稳定性和最适温度也有一定的提高,但酶的比活性显著下降.结果证实,木聚糖酶XYNB的第46位Asn与其最适pH值相关.对导致酶学性质改变的可能因素进行了分析,结果为进一步的结构与功能研究提供了资料.
作 者： 杨浩萌 柏映国 李江 罗会颖 王亚茹 伍宁丰 范云六 姚斌 YANG Hao-Meng BAI Ying-Guo LI Jiang LUO Hui-Ying WANG Ya-Ru WU Ning-Feng FAN Yun-Liu YAO Bin 作者单位： 杨浩萌,柏映国,李江,罗会颖,王亚茹,姚斌,YANG Hao-Meng,BAI Ying-Guo,LI Jiang,LUO Hui-Ying,WANG Ya-Ru,YAO Bin(中国农业科学院饲料研究所,北京,100081)伍宁丰,范云六,WU Ning-Feng,FAN Yun-Liu(中国农业科学院生物技术研究所,北京,100081)
刊 名： 中国生物化学与分子生物学报 ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY 年，卷(期)： 2006 22(3) 分类号： Q55 关键词： 木聚糖酶 XYNBN46D 定点突变 pH特性