新城疫病毒HN基因诱导人肺癌细胞SPC-A1凋亡的作用机制
为了探索新城疫病毒血凝素神经氨酸酶(HN)基因对人肺癌细胞SPC-A1的作用及机制,将含有HN基因的重组质粒pVHN经脂质体介导转染人肺癌细胞SPC-A1,通过MTT方法检测细胞活力;采用吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色分析肿瘤细胞凋亡;罗丹明123和DCFA染色测定线粒体跨膜电位(△ψm)和活性氧水平变化;流式细胞仪分析MHC-Ⅰ分子表达;底物染色反应检测caspase-3活性.结果重组质粒pVHN转染人肺癌细胞SPC-A1 48 h后,细胞活力明显降低;AO/EB染色可见明显的细胞凋亡形态学变化;与空质粒对照相比,线粒体△ψm下降(P＜0.01),活性氧水平升高(P＜0.05);细胞表面MHC-I分子表达上调(P＞0.05);caspase-3活性增强(P＜0.01).以上结果提示,新城疫病毒HN基因能够上调SPC-A1细胞表面MHC-Ⅰ分子表达,并通过上调ROS水平,下调线粒体△ψm,进而激活caspase-3,最终诱导人肺癌细胞凋亡.
作 者： 连海 金宁一 李霄 陈立刚 张静敏 管国芳 孙丽丽 李雪梅 郑洪玲 崔英姬 LIAN Hai JIN Ning-Yi LI Xiao CHEN Li-Gang ZHANG Jing-Min GUAN Guo-Fang SUN Li-Li LI Xue-Mei ZHENG Hong-Ling CUI Ying-Ji 作者单位： 连海,LIAN Hai(解放军军事医学科学院解放军基因工程重点实验室,长春,130062;吉林大学农学部畜牧兽医学院,长春,130062)金宁一,李霄,陈立刚,张静敏,管国芳,孙丽丽,李雪梅,郑洪玲,JIN Ning-Yi,LI Xiao,CHEN Li-Gang,ZHANG Jing-Min,GUAN Guo-Fang,SUN Li-Li,LI Xue-Mei,ZHENG Hong-Ling(解放军军事医学科学院解放军基因工程重点实验室,长春,130062)
崔英姬,CUI Ying-Ji(吉林大学农学部图书馆,长春,130062)
刊 名： 中国生物化学与分子生物学报 ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY 年，卷(期)： 2006 22(3) 分类号： Q255 Q75 关键词： 新城疫病毒 HN基因 人肺癌细胞 凋亡