重组葡激酶的高效表达与纯化
通过发酵和纯化条件的研究,建立适合重组葡激酶工程菌的发酵和纯化工艺.对重组葡激酶工程菌发酵过程中的pH、饱和氧浓度、补料以及诱导时间进行考察,获得该工程菌的高效表达条件.在此条件下,重组葡激酶表达水平在50%以上,并以活性可溶性状态存在于细胞内;经渗滤,超滤浓缩、透析,DEAE-Sepharose FF层析和Sp-Sepharose FF层析后,经SDS-PAGE和HPLC分析,纯度达到99%.在还原条件下进行SDS-PAGE分析,测得该酶相对分子质量为15.5kD,等电聚焦显示其等电点为8.4.
作 者: 卢锦 霍蕾 田天丽 徐非一 刘玉应 孙启玲 LU Jin HUO Lei TIAN Tian-li XU Fei-yi LIU Yu-ying SUN Qi-ling 作者单位: 四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都,610064 刊 名: 四川大学学报(自然科学版) ISTIC PKU 英文刊名: JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION) 年,卷(期): 2006 43(6) 分类号: Q5 关键词: 重组葡激酶 工艺优化 高效表达