重组葡激酶的高效表达与纯化

重组葡激酶的高效表达与纯化

通过发酵和纯化条件的研究,建立适合重组葡激酶工程菌的发酵和纯化工艺.对重组葡激酶工程菌发酵过程中的pH、饱和氧浓度、补料以及诱导时间进行考察,获得该工程菌的高效表达条件.在此条件下,重组葡激酶表达水平在50%以上,并以活性可溶性状态存在于细胞内;经渗滤,超滤浓缩、透析,DEAE-Sepharose FF层析和Sp-Sepharose FF层析后,经SDS-PAGE和HPLC分析,纯度达到99%.在还原条件下进行SDS-PAGE分析,测得该酶相对分子质量为15.5kD,等电聚焦显示其等电点为8.4.

作 者： 卢锦 霍蕾 田天丽 徐非一 刘玉应 孙启玲 LU Jin HUO Lei TIAN Tian-li XU Fei-yi LIU Yu-ying SUN Qi-ling   作者单位： 四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都,610064  刊 名： 四川大学学报（自然科学版）  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)  年，卷(期)： 2006 43(6)  分类号： Q5  关键词： 重组葡激酶   工艺优化   高效表达  

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