天然抗菌肽分离纯化方法的建立
目的 寻找高效、广谱的新型天然抗菌肽,建立稳定、有效的分离纯化方法.方法 家蝇免疫诱导后制成组织匀浆,经超速离心、分子筛过滤、Sephadex G50层析、反相高效液相色谱法(RP-HPLC)、透析浓缩等技术进行分离纯化,用K-B法鉴定抗菌活性.结果 组织提取液经超速离心后,用pH 6.8 Tris-HCl尿素缓冲液作流动相,Sephadex G50层析,收集到有明显抗菌活性的成分.再用pH 6.8磷酸盐缓冲液作流动相,经RP-HPLC半制备柱进一步纯化,各成分分离效果良好,保留时间为18.008 min处的谱峰,有明显的抗菌活性.用RP-HPLC分析柱显示其为单一成分,达到了色谱纯.该抗菌肽对大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant S.aureus,MRSA)均有抗菌活性.结论 建立了有效的家蝇抗菌肽分离纯化方法,纯化的家蝇抗菌肽有广谱抗菌活性.
作 者： 周义文 申萍 涂植光 尹一兵 陈辉 孟江萍 王小中 卢亮 陈如山 陈正庚 作者单位： 周义文(广东省深圳市孙逸仙心血管医院,518021)申萍,卢亮,陈如山,陈正庚(广东省深圳市第二人民医院药剂科,518035)
涂植光,尹一兵,陈辉,孟江萍,王小中(重庆医科大学检验系,400016)
刊 名： 国际检验医学杂志 ISTIC 英文刊名： INTERNATIONAL JOURNAL OF LABORATORY MEDICINE 年，卷(期)： 2007 28(9) 分类号： Q2-33 关键词： 家蝇抗菌肽 抗菌活性 纯化 方法学