IgM型单克隆抗体之scFv库的建立与筛选
从一个抗脂磷酸聚糖IgM型单克隆抗体细胞的mRNA中经RT-PCR克隆重链可变区(VH)和轻链可变区(VL),然后将VH、Linker和VL连接成scFv,并克隆到载体pCANTAB-5E,转Escherichia coli TG1感受态细胞,构建了单链抗体库.通过辅助噬菌体M13KO7感染后,使单链抗体展示在噬菌体衣壳蛋白pIII的N端,得到噬菌体展示的抗体库.将抗体库用于 "淘洗-富集-扩增" 3轮以后,得到针对脂磷酸聚糖特异性的噬菌体抗体.测序结果表明,该scFv的VH基因序列全长390 bp,编码127个氨基酸;VL基因序列全长341 bp,编码113个氨基酸.二者均符合小鼠免疫球蛋白可变区基因特征,含有4个框架区(FR)、3个抗原互补决定区(CDR)及抗体特征性的2个半胱氨酸残基.
作 者： 单超 李兰 王宗华 SHAN Chao LI Lan WANG Zong-hua 作者单位： 福建农林大学生命科学学院,福建,福州,350002 刊 名： 亚热带农业研究 英文刊名： SUBTROPICAL AGRICULTURE RESEARCH 年，卷(期)： 2009 5(2) 分类号： Q939.91 关键词： 脂磷酸聚糖 单链抗体 抗体库