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酸弗林蛋白酶酸性氨基酸簇分选蛋白-1的原核表达、纯化及多克隆抗体制备

时间:2021-12-12 19:48:47 生物医学论文 我要投稿

酸弗林蛋白酶酸性氨基酸簇分选蛋白-1的原核表达、纯化及多克隆抗体制备

目的:原核表达和纯化PACS-1,并制备其多克隆抗体.方法:通过RT-PCR扩增出PACS-1的编码基因,测序正确后克隆入原核表达载体pGEX4T-1,转化大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG诱导PACS-1与GST融合蛋白的表达并经Glutathione Sepharose 4B纯化;经SDS-PAGE和Western blot鉴定,应用纯化的蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,用ELISA测定抗体的效价.结果:表达和纯化了PACS-1,并获得了较高效价的抗血清.结论:获得纯化的PACS-1及其多克隆抗体,为进一步研究PACS-1的功能奠定了基础.

作 者: 李英辉 刘忠湘 赵亚 黄豫晓 刘军 薛采芳 万磊 LI Ying-Hui LIU Zhong-Xiang ZHAO Ya HUANG Yu-Xiao LIU Jun XUE Cai-Fang WAN Lei   作者单位: 第四军医大学,病原生物学教研室,陕西,西安,710032  刊 名: 生物技术通讯  ISTIC 英文刊名: LETTERS IN BIOTECHNOLOGY  年,卷(期): 2008 19(3)  分类号: Q78  关键词: PACS-1   原核表达   多克隆抗体