酸弗林蛋白酶酸性氨基酸簇分选蛋白-1的原核表达、纯化及多克隆抗体制备
目的:原核表达和纯化PACS-1,并制备其多克隆抗体.方法:通过RT-PCR扩增出PACS-1的编码基因,测序正确后克隆入原核表达载体pGEX4T-1,转化大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG诱导PACS-1与GST融合蛋白的表达并经Glutathione Sepharose 4B纯化;经SDS-PAGE和Western blot鉴定,应用纯化的蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,用ELISA测定抗体的效价.结果:表达和纯化了PACS-1,并获得了较高效价的抗血清.结论:获得纯化的PACS-1及其多克隆抗体,为进一步研究PACS-1的功能奠定了基础.
作 者: 李英辉 刘忠湘 赵亚 黄豫晓 刘军 薛采芳 万磊 LI Ying-Hui LIU Zhong-Xiang ZHAO Ya HUANG Yu-Xiao LIU Jun XUE Cai-Fang WAN Lei 作者单位: 第四军医大学,病原生物学教研室,陕西,西安,710032 刊 名: 生物技术通讯 ISTIC 英文刊名: LETTERS IN BIOTECHNOLOGY 年,卷(期): 2008 19(3) 分类号: Q78 关键词: PACS-1 原核表达 多克隆抗体