利用改进的Oligo-capping法构建手掌参全长cDNA文库
Oligo-capping法是构建全长cDNA文库的重要方法之一.以名贵中药手掌参(Gymnadenia conopsea R.Br.)的幼芽组织为材料,通过减少mRNA的用量,用pUC18作载体,设计特异引物对第1链cDNA进行PCR扩增,按片段大小分级回收cDNA,形成了一种以Oligo-capping法为基础,构建珍稀材料全长cDNA文库的快速、简单的技术体系.利用该方法,首次成功地构建了手掌参的全长cDNA文库.经综合评价,文库容量达到了8×105个/μg cDNA,全长cDNA比例达到68%,重组率超过96%,说明本实验的改进非常成功.该文库的建成为手掌参的遗传资源保护和功能基因发掘等理论与应用研究奠定了基础.
作 者： 周建平 杨足君 白丽莉 冯娟 李光蓉 邓科君 任正隆 ZHOU Jian-ping YANG Zu-jun BAI Li-li FENG Juan LI Guang-rong DEN Ke-jun REN Zheng-long 作者单位： 中国电子科技大学,生命与技术学院,成都,610054 刊 名： 西北植物学报 ISTIC PKU 英文刊名： ACTA BOTANICA BOREALI-OCCIDENTALIA SINICA 年，卷(期)： 2006 26(9) 分类号： Q343.1 关键词： 全长cDNA文库 Oligo-capping法 手掌参