TBa过敏原表位区段的融合表达及免疫活性分析
为了确定苦荞过敏原TBa(tartary buckwheat allergen)的抗原表位及进一步了解荞麦过敏反应机制,本实验以苦荞过敏原TBa cDNA序列为模板,设计引物,克隆苦荞过敏原TBa表位区段基因,分别构建TBa及两个表位区段原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达并纯化,采用竞争ELISA对其免疫活性进行分析与比较.SDS-PAGE及Western Blot鉴定和检测结果表明,目的蛋白在E.coli BL21(DE3)中可高效表达,其N端带有6个组氨酸标签.Ni2+-NTA琼脂糖柱亲和纯化得到了纯度较高的目的片段.ELISA实验结果显示,表达产物与荞麦食品过敏病人血清中的IgE具有特异的结合活性.本研究为揭示苦荞过敏蛋白结构与功能的关系奠定了基础.
作 者： 蔡桂红 李玉英 张政 王转花 CAI Gui-hong LI Yu-ying ZHANG Zheng WANG Zhuan-hua 作者单位： 化学生物学与分子工程教育部重点实验室,山西大学生物技术研究所,山西,太原,030006 刊 名： 食品科学 ISTIC PKU 英文刊名： FOOD SCIENCE 年，卷(期)： 2006 27(11) 分类号： Q78 R392 关键词： 苦荞麦过敏原 表位 融合表达 免疫活性