4种金属离子亲和层析纯化重组类人胶原蛋白的效果比较
对利用金属离子亲和层析纯化重组类人胶原蛋白过程中使用的金属离子进行了比较,从而对分离纯化的条件进行优化.在相同实验条件下,用4种金属离子柱分离纯化目的蛋白.结果显示,经4种金属离子柱纯化后镍柱的总蛋白收获率最高,铜柱与锌柱居中,钙柱最低;而柱保留时间则为锌柱最高(12.38 min),钙柱最低(8.25 min);钙柱洗脱时所需咪唑解离初始浓度最低(100 mmol/L),锌柱最高(200 mmol/L);对SDS-PAGE电泳图进行分析得纯化后类人胶原蛋白的纯度分别为:镍柱82.8%,铜柱83.4%,锌柱96.2%,钙柱94.3%.由此可见锌柱对目标蛋白的亲和力最高,且纯化后类人胶原蛋白的纯度也最高.因此,确定锌离子作为亲和层析纯化重组类人胶原蛋白的金属离子.
作 者： 王晓军 范代娣 WANG Xiao-jun FAN Dai-di 作者单位： 王晓军,WANG Xiao-jun(西安工程大学,环化学院,陕西,西安,710048)范代娣,FAN Dai-di(西北大学,化工学院,陕西,西安,710069)
刊 名： 应用化工 ISTIC 英文刊名： APPLIED CHEMICAL INDUSTRY 年，卷(期)： 2009 38(6) 分类号： O636 关键词： 重组类人胶原蛋白 金属螯合亲和层析 金属离子 纯化