全蛋白提取组织裂解液配方
Western-Blot 全蛋白提取组织裂解液配方
1. 储备液
10% Triton X-100
Triton X-100 蒸馏水
10ml 90ml
混合后37℃-40℃水浴中2-3hr，使其充分混匀
10% 去氧胆酸纳
去氧胆酸纳 蒸馏水 避光保存
200mmol/L PMSF(苯甲基磺酰氯)
PMSF
174.2mg 5ml
1g 10ml
异丙醇
分装，-20℃保存
100mmol/L EDTA
EDTA
372.24mg 10ml
蒸馏水
1mg/mL亮抑酶肽(Leupeptin)
亮抑酶肽 蒸馏水
2mg 2ml
分装，-20℃保存
1mg/mL 抑蛋白酶肽(Aprotinin)
抑蛋白酶肽 蒸馏水
2mg 2ml
分装，-20℃保存
1mg/mL 胃蛋白酶抑制剂(Pepstatin)
胃蛋白酶抑制剂 甲醇
2mg 2ml
分装，-20℃保存
2. 工作液
Tris-base (50mmol/L，pH 7.4)：
Tris-base NaCl
605mg 900mg 75ml
蒸馏水
用HCl调整pH值为7.4
10% Triton X-100 10% 去氧胆酸纳 100mmol/L EDTA 用前加入：
1mg/mL亮抑酶肽 1mg/mL 抑蛋白酶肽
100?l 100?l 100?l 500?l
10mL 2.5mL 1mL
1mg/mL 胃蛋白酶抑制剂 200mmol/L PMSF
各成分的终浓度
Tris-base
50mmol/L，pH 7.4 1% 0.25% 150mmol/L 1 mmol/L 1?g/mL 1?g/mL 1?g/mL 1mmol/L
Triton X-100 去氧胆酸纳 NaCl EDTA
亮抑酶肽
抑蛋白酶肽
胃蛋白酶抑制剂 PMSF
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