三重实时荧光RT-PCR检测三种鱼类弹状病毒的研究
鱼传染性造血器官坏死病病毒(Infectious hematopoietic necros virus IHNV)、鱼病毒性出血性败血症病毒(Viral hemorrhagic septicemia virus VHSV)和鲤春病毒血症病毒(Spring viraemia of carp virus SVCV)是同属弹状病毒科(Rhabdoviridae)的3种鱼类病毒,也是影响水产养殖业的3种重要病毒.通过对这3种病毒基因序列的分析,在病毒基因的高保守区域,设计了3条分别针对这3种病毒的TaqmanMGB探针,并选择3种无相互干扰的荧光基团进行标记.以此为基础建立针对该3种病毒的三重实时荧光RT-PCR的检测方法.通过反应条件的优化,该三重实时荧光RT-PCR最低可检测至102拷贝/反应的病毒量.同时.该方法还对病毒混合感染EPC细胞(Epithelioma papulosum cyprini)和攻毒斑马鱼进行了检测.实验结果表明,该方法是一种特异、灵敏、高效的病毒检测方法.
段向英,张利峰,Duan Xiangying,Zhang Lifeng(北京出入境检验检疫局,北京)
张念之,蒋一男,Zhang Nianzhi,Jiang Yinan(中国农业大学农业部预防兽医学重点实验室,北京,100094)
刊 名： 检验检疫学刊 英文刊名： INSPECTION AND QUARANTINE SCIENCE 年，卷(期)： 2009 19(1) 分类号： S941.41 Q503 关键词： IHNV VHSV SVCV Taqman MGB探针 三重实时荧光RT-PCR