人早孕绒毛组织的体外原代培养和人滋养细胞株的建立
目的:建立快速、有效的绒毛滋养细胞体外原代培养的方法以及建立人滋养细胞株和初步评价.方法:采用胰酶和胶原酶I混合消化法消化绒毛组织,用胰蛋白酶消化传代体外培养,通过光镜、透射电镜和免疫荧光激光共聚焦方法对培养出的细胞进行形态和骨架评价.结果:显微镜下可见细胞呈多边形,细胞平铺生长,有细胞融合后形成的合体滋养层细胞;透射电镜下可见细胞表面的微绒毛丰富;胞质丰富,内质网扩张明显,有丰富的糖原颗粒、髓样小体和明显的脂滴,以及细胞间紧密的桥粒样结构连接;直接免疫荧光双标记染色检测到角蛋白18和波形蛋白均为阳性.结论:采用胰酶和胶原酶I混合消化法可获得较纯的滋养细胞,通过光镜、透射电镜和免疫荧光激光共聚焦检测细胞外形和骨架,确定该体外传至56代的细胞株为滋养细胞株.
作 者: 张磊 门可 邵中军 王安辉 徐德忠 闫永平 张景霞 李端 崔恒春 邵晨 作者单位: 张磊,门可,邵中军,王安辉,徐德忠,闫永平,张景霞,李端,崔恒春(第四军医大学预防医学系流行病学教研室,西安,710032)邵晨(西京医院泌尿外科)
刊 名: 现代妇产科进展 ISTIC PKU 英文刊名: PROGRESS IN OBSTETRICS AND GYNECOLOGY 年,卷(期): 2006 15(2) 分类号: Q2-33 关键词: 胎盘绒毛 原代培养 滋养层细胞株 早孕