B72和hTERT的真核表达载体的构建与鉴定
目的:构建同时表达B72和hTERT的真核表达载体.方法:根据GenBank中的序列,对B72、hTERT各设计一对两端带特定限制性酶切位点的引物,分别从乳腺组织、乳癌组织提取总RNA,进行RT-PCR后,将2扩增产物分别克隆在pGEM-T载体,然后双酶切各pGEM-T载体,回收目的片段,将2目的片段再克隆至真核表达质粒pEGFP-C3中,并对重组体进行PCR鉴定和测序分析.结果:PCR扩增片段与预期结果相符,B72/hTERT真核表达载体构建成功,插入片段测序结果与GenBank公布的基因一致.结论:成功构建B72/hTERT真核表达载体.
作 者： 丁丽 赵国强 范清堂 DING Li ZHAO Guoqiang FAN Qingtang 作者单位： 丁丽,DING Li(郑州铁路职业技术学院医学分院检验系,郑州,450052)赵国强,ZHAO Guoqiang(郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室,郑州,450052)
范清堂,FAN Qingtang(河南省分子医学重点学科开放实验室,郑州,450052)
刊 名： 郑州大学学报（医学版） ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF ZHENGZHOU UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES) 年，卷(期)： 2006 41(3) 分类号： Q782 关键词： B72 hTERT 真核表达载体