随机十肽库的构建及血管形成素结合肽的筛选
将合成的含有随机序列(NNK)10的寡核苷酸片段,克隆入噬菌体呈现载体噬菌粒pCANTAB5E的SfiⅠ,NotⅠ位点,即cpⅢ蛋白信号肽与成熟肽之间,电转化E.coli TG1,构建了噬菌体表面呈现的十肽库,实际库容为3.53×107,插入率为66.7%.经辅助噬菌体M13KO7超感染后,获得滴度为4.8 ×1011 pfu/ml的噬菌体上清.经过两轮panning筛选和富集,从构建的随机十肽库中筛选到26个具有血管形成素结合活性的重组噬菌体克隆,对其中12个阳性噬菌体克隆的短肽序列进行了分析,ELISA检测结果显示12个阳性噬菌体克隆都能够与血管形成素特异性结合.
作 者： 杨辉 张英起 颜真 韩苇 药立波 苏成芝 YANG Hui ZHANG Ying-Qi YAN Zhen HAN Wei YAO Li-Bo SU Cheng-Zhi 作者单位： 杨辉,张英起,颜真,韩苇,YANG Hui,ZHANG Ying-Qi,YAN Zhen,HAN Wei(第四军医大学生物技术中心,西安,710032)药立波,苏成芝,YAO Li-Bo,SU Cheng-Zhi(第四军医大学生物化学与分子生物学教研室,西安,710032)
刊 名： 生物化学与生物物理进展 ISTIC SCI PKU 英文刊名： PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS 年，卷(期)： 2000 27(6) 分类号： Q74 关键词： 噬菌体表面呈现 随机短肽库 血管形成素