Ssp dnaB蛋白质内含子介导的重组人脑钠素的制备
脑钠素(BNP)是临床治疗代偿失调性心衰竭的有效药物.将脑钠素与组氨酸标签(His-tag)以及具有自我剪切功能的Ssp dnaB微型蛋白质内含子进行融合表达.表达产物经Ni-Sepharose亲和层析及体外复性处理后,用CM-纤维素对复性产物进行了浓缩,并通过改变CM-纤维素柱内的pH及温度,诱导Ssp dnaB微型蛋白质内含子的剪切作用,使脑钠素从融合蛋白中释放并与载体蛋白(His-DnaB)分离,再经C4反相高效液相色谱法进一步纯化后,从每升培养液中获得了2.8mg纯度达97%的重组人脑钠素.体外活性测定结果表明,重组人脑钠素对兔胸主动脉条具有显著的血管舒张效应,其EC50为1.94×10-6mg/mL.
作 者: 狄洌 张宏伟 徐朗莱 DI Lie ZHANG Hong-Wei XU Lang-Lai 作者单位: 狄洌,徐朗莱,DI Lie,XU Lang-Lai(南京农业大学生命科学学院,南京,210095)张宏伟,ZHANG Hong-Wei(江苏靖江市人民医院,靖江,214500)
刊 名: 生物工程学报 ISTIC PKU 英文刊名: CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY 年,卷(期): 2006 22(2) 分类号: Q71 关键词: 多肽制备 脑钠素 蛋白质内含子 蛋白质剪接