亲和层析法分离纯化猪肺血管紧张素转换酶
亲和胶合成实验以双环氧化合物1,4-丁二醇-2-缩水甘油醚(1,4-butanediol diglycidyl ether)为活化体及连接臂,在硼氢化钠(NaBH)存在的碱性条件下,将载体Sepharose CL―4B与雷诺普利(lisinopril)共价连接在一起,成功合成亲和层析胶,并利用亲和层析胶对猪肺血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme, ACE)进行分离提纯.猪肺组织匀浆经1.6～2.6 mol/L硫酸铵分级沉淀、透析平衡、亲和柱分离等步骤,从200 g猪肺中提纯得到0.79 mg ACE蛋白,酶活力回收11.9%,比活力38.8 U/mg.与层析前的酶液比较,亲和层析一步提纯可达264倍;与肺匀浆液比较提纯达808倍.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳可见,提纯的猪肺ACE为一条带,分子质量约为180 ku.
作 者： 刘宏 陈兰英 LIU Hong CHEN Lan-Ying 作者单位： 刘宏,LIU Hong(中国医学科学院心血管病研究所,北京,100037)陈兰英,CHEN Lan-Ying(中国协和医科大学阜外心血管病医院,北京,100037)
刊 名： 生物化学与生物物理进展 ISTIC SCI PKU 英文刊名： PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS 年，卷(期)： 2000 27(5) 分类号： Q503 关键词： 亲和层析胶制备 分离纯化 血管紧张素转换酶