重组酿酒酵母5-氨基酮戊酸合酶在大肠杆菌的表达
以酿酒酵母基因组为模板,采用PCR扩增出编码成熟5-氨基酮戊酸合酶(第一个氨基酸残基为Asn63)的基因hem1,将其克隆到pMAL-2x中构建重组表达载体,转化大肠杆菌表达菌株BL21(DE3),在0.5 mmol·L-1的IPTG诱导下,SDS-PAGE显示分子量约为49 kD的特异条带.重组菌在紫外灯下显示红色荧光,表明酶在大肠杆菌体内活性表达.体外反应表明,在浓度超过0.1 mmol·L-1的IPTG诱导下,酶活力下降,培养基的初始pH值约为6.5,5-氨基酮戊酸产量达最大,且主要分泌到胞外.
作 者： 何晓梅 周静 范军 朱苏文 程备久 HE Xiao-mei ZHOU Jing FAN Jun ZHU Su-wen CHENG Bei-jiu 作者单位： 安徽农业大学生命科学学院,合肥,230036 刊 名： 安徽农业大学学报 ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL UNIVERSITY 年，卷(期)： 2006 33(4) 分类号： Q786 关键词： 5-氨基酮戊酸合酶 酿酒酵母 重组表达 5-氨基酮戊酸产量