腺病毒介导的骨形态发生蛋白-2基因转染脂肪间充质干细胞的实验研究
目的探讨腺病毒介导的人骨形态发生蛋白-2(Ad-hBMP-2)基因转染大鼠脂肪间充质干细胞(ADSCs)的可行性及其成骨特性.方法取4周龄SD大鼠腹股沟的脂肪组织,经体外分离培养的方法获得ADSCs,分别转染以腺病毒为载体的绿色荧光蛋白(Ad-GFP)基因和Ad-hBMP-2基因.用荧光显微镜每隔12 h观察转染Ad-GFP的细胞,并确定转染率,观察其形态变化,绘制生长曲线;利用免疫细胞化学法对转染Ad-hBMP-2的细胞作碱性磷酸酶(ALP)染色,用免疫细胞化学法作骨钙素(OC)检测确定成骨活性,Western blot法检测hBMP-2的表达.结果12 h后荧光显微镜观察转染Ad-GFP的细胞,有52%的阳性表达细胞,48 h后转染率达95%;转染Ad-hBMP-2后倍增时间延长,ALP、OC检测为阳性表达,hBMP-2蛋白转染后48 h为阳性表达,并持续至第5代.结论ADSCs可以作为腺病毒转染的载体,转染Ad-hBMP-2基因后有明显的成骨作用,可以作为骨组织工程的种子细胞.
魏奉才,晋国营,WEI Feng-cai,JIN Guo-ying(山东大学齐鲁医院,口腔颌面外科)
单秀丽,孙树阳,SHAN Xiu-li,SUN Shu-yang(山东大学口腔医院,中心实验室,山东,济南,250012)
刊 名： 华西口腔医学杂志 ISTIC PKU 英文刊名： WEST CHINA JOURNAL OF STOMATOLOGY 年，卷(期)： 2006 24(3) 分类号： Q254 关键词： 脂肪间充质干细胞 骨形态发生蛋白-2 腺病毒 基因转染