α-淀粉酶基因启动子-35区的诱变及其对大肠杆菌内表达量的影响

时间:2023-05-02 08:17:06 生物医学论文

α-淀粉酶基因启动子-35区的诱变及其对大肠杆菌内表达量的影响

对来自野油菜黄单胞菌的α-淀粉酶基因(Gene Bank的序列号为AY167892)的启动子进行定点诱变,研究启动子的碱基改变对该基因在大肠杆菌中表达量的影响,在基因工程中有重要的意义.以α-淀粉酶基因连接到pBluescript KS+形成的重组质粒PHNH003为模板,通过PCR得到该α-淀粉酶基因启动子-35区上游序列截短141bp的基因,并通过定点诱变改变该截短基因启动子-35区第2位和第3位的碱基(即TGCACA→TTGACA),分别把这2个基因克隆至pBluescript KS+并转化大肠杆菌DH5α.并把PHNH003转化至大肠杆菌DH5α,作为对照菌株.结果表明,含截短基因的菌株的α-淀粉酶活性比对照菌株提高24%;含点突变的截短基因的菌株的α-淀粉酶活性比对照提高100%.并分析了α-淀粉酶基因启动子-35区上游序列及-35区2个碱基的突变对基因在大肠杆菌中表达量的影响.

作 者: 黄春晓 崔锦 马向东 HUANG Chun-xiao CUI Jin MA Xiang-dong   作者单位: 黄春晓,HUANG Chun-xiao(河南农业大学生命科学学院,河南,郑州,450002;中原工学院能源与环境学院,河南,郑州,450007)

崔锦,马向东,CUI Jin,MA Xiang-dong(河南农业大学生命科学学院,河南,郑州,450002) 

刊 名: 河南农业科学  ISTIC PKU 英文刊名: JOURNAL OF HENAN AGRICULTURAL SCIENCES  年,卷(期): 2006 ""(5)  分类号: Q814  关键词: α-淀粉酶基因   启动子   定点诱变   大肠杆菌   表达  

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