五指山猪近交系精原干细胞体外培养研究

五指山猪近交系精原干细胞体外培养研究

对不同发育阶段五指山小型猪(WZSP)近交系的睾丸组织,采用不同的消化和培养方法进行了一系列的探索、研究.实验显示:培养SSCs的最佳时限为仔猪出生后1～20日龄;对不同日龄仔猪采用不同消化方法,以DMEM为基础培养液并添加不同成分,34℃,5%CO2培养箱中饱和湿度条件下培养,可获得较好的分离培养结果;原代SSCs在培养8d后,SSCs开始增殖,桑椹状的SSCs集落半悬浮隆突生长;SSCs集落AKP染色,细胞呈阳性反应;对SSCs细胞团在STO饲养层上进行传代培养,SSCs贴壁良好,培养4d左右大部分SSCs集落和单细胞消失;采用曲精细管组织贴壁培养法也同样获得桑椹状SSCs集落,细胞集落在培养5d后出现,半悬浮生长.此外,睾丸组织在4℃PBS液中存放24h后,仍可作为SSCs分离、培养的材料.结果表明:本研究初步掌握了WZSP近交系精原干细胞体外分离、培养的技术方法,为其进一步深入研究提供了技术方法和操作依据.

作 者： 成钢 冯书堂 CHENG Gang FENG Shu-Tang   作者单位： 成钢,CHENG Gang(湖南文理学院,常德,415000)

冯书堂,FENG Shu-Tang(中国农业科学院畜牧研究所,北京,100094) 

刊 名： 生物工程学报  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2006 22(4)  分类号： Q813.1  关键词： 五指山猪   SSCs   消化方法   日龄   体外培养  

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