一种提取动物基因组总DNA的野外样品保存方法
为了确定一种方便的野外动物样品保存方法,以新鲜材料作对照,从-20℃冰箱、70%乙醇、含50 mmol/L EDTA的70%乙醇、95%乙醇、液氮处理的高原鼠肌肉和肝脏组织中提取基因组总DNA.通过琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计对提取的基因组总DNA质量进行检测.结果显示:相同处理的肝脏DNA产量大,肌肉组织提取的DNA质量好;各种保存方法提取的DNA降解程度依次为,-20 ℃冰箱、70%乙醇＞含50 mmol/L EDTA的70%乙醇、95%乙醇＞液氮＞新鲜.选择新鲜肌肉和95%酒精处理的肌肉样品提取的总DNA作模板,进行微卫星PCR扩增,均可获得清晰的电泳带.将该方法用于高原鼢鼠,进行线粒体12S rRNA、Cyt b和D-loop区测序,结果显示该方法保存的样品与新鲜样品没有差别.因此,在野外用95%乙醇固定肌肉样品是一种可行的样品保存方法.
作 者： 蔡振媛 张同作 连新明 慈海鑫 苏建平 CAI Zhen-yuan ZHANG Tong-zuo LIAN Xin-ming CI Hai-xin SU Jian-ping 作者单位： 蔡振媛,连新明,慈海鑫,CAI Zhen-yuan,LIAN Xin-ming,CI Hai-xin(中国科学院西北高原生物研究所,西宁,810008;中国科学院研究生院)张同作,苏建平,ZHANG Tong-zuo,SU Jian-ping(中国科学院西北高原生物研究所,西宁,810008)
刊 名： 四川动物 ISTIC PKU 英文刊名： SICHUAN JOURNAL OF ZOOLOGY 年，卷(期)： 2006 25(3) 分类号： Q78 关键词： 野外取样 高原鼠兔 高原鼢鼠 样品保存方法 总DNA提取