麻疯树脂酶全长基因克隆、表达及其蛋白质结构预测

麻疯树脂酶全长基因克隆、表达及其蛋白质结构预测

脂酶(Lipase,EC3.1.1.3)是普遍应用于皮革、饲料及生物柴油工业的工业酶制剂,具有广泛的应用价值.目前对植物来源的脂酶研究较少.本研究用在生物柴油中具有应用前景的油料植物--麻疯树(Jatropha curcas)作为研究对象,克隆了该物种的脂酶基因(JcLIP).通过多序列比对并结合物种的亲缘关系设计了具有较高特异性的简并引物,通过使用RT-PCR和lRACE技术,最终获得了麻疯树脂酶基因的全长序列并成功地在大肠杆菌中表达,酶活测定结果表明,麻疯树脂酶在大肠杆菌中表达在包涵体中,但是能产生具有活力的蛋白质,酶活约为0.8 U·mL-1.结构预测和比较表明,JcLIP蛋白质具有脂酶的结构核心和催化活性中心,而在非核心区具有较毛霉脂酶更多的插入和随机卷曲,这可能是决定二者之间酶活差异的重要原因.

作 者： 王小行 彭峰 牛冬云 李钢 陈放 Xiaoxing Wang Feng Peng Dongyun Niu Gang Li Fang Chen   作者单位： 王小行,陈放,Xiaoxing Wang,Fang Chen(四川大学生命科学学院,成都,610064)

彭峰,牛冬云,李钢,Feng Peng,Dongyun Niu,Gang Li(四川川大光耀生物工程有限公司,成都,610065) 

刊 名： 植物学通报  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE BULLETIN OF BOTANY  年，卷(期)： 2006 23(6)  分类号： Q94  关键词： 脂酶   麻疯树   简并引物   蛋白质结构  

【麻疯树脂酶全长基因克隆、表达及其蛋白质结构预测】相关文章：

Armillariella tabescens阿拉伯糖苷酶基因全长cDNA的克隆与表达04-26

蛋白质结构的预测及其应用04-27

桃ACC合酶基因的分离及其差异表达04-30

家蚕组织蛋白酶D基因的克隆、序列分析及其表达谱研究04-30

共轭亚油酸的生物合成及相关酶基因的克隆与表达04-26

臭鼻杆菌腈水解酶基因(bxn)的克隆及其在原核生物中的表达04-27

耐热果胶裂解酶基因pel9A的克隆和表达04-30

β-葡萄糖苷酶基因的克隆与表达研究进展04-26

两种泥鳅芳香化酶基因的克隆与时空表达04-27

丙型肝炎病毒NS5B全长基因及截短形式基因的克隆、表达及鉴定04-26