耐热果胶裂解酶基因pel9A的克隆和表达
利用PCR技术从耐热梭状芽孢杆菌(Clostridium stercorarium)中扩增得到产耐热果胶裂解酶的结构基因pel9A,并将其克隆于表达载体pET28a中,最后将此重组质粒转化到受体菌E.coli BL-21中进行表达.诱导条件为:37 ℃诱导5 h,IPTG浓度为0.8 mmol/L.重组菌经IPTG诱导和SDS-PAGE分析表达的蛋白质的相对分子质量为130 000,与预期相对分子质量相符.细胞经超声破碎后,测得果胶酶的比酶活为15 U/mg粗蛋白.
作 者: 甄东晓 王树英 严群 李华钟 ZHEN Dong-xiao WANG Shu-ying YAN Qun LI Hua-zhong 作者单位: 甄东晓,严群,ZHEN Dong-xiao,YAN Qun(江南大学,工业生物技术教育部重点实验室,江苏,无锡,214036)王树英,WANG Shu-ying(江南大学,分析测试中心,江苏,无锡,214036)
李华钟,LI Hua-zhong(江南大学,工业生物技术教育部重点实验室,江苏,无锡,214036;江南大学,医学系,江苏,无锡,214036)
刊 名: 食品与生物技术学报 ISTIC PKU 英文刊名: JOURNAL OF FOOD SCIENCE AND BIOTECHNOLOGY 年,卷(期): 2006 25(3) 分类号: Q557 关键词: 果胶裂解酶 耐热梭状芽孢杆菌 重组质粒 大肠杆菌BL-21 表达