耐热果胶裂解酶基因pel9A的克隆和表达

耐热果胶裂解酶基因pel9A的克隆和表达

利用PCR技术从耐热梭状芽孢杆菌(Clostridium stercorarium)中扩增得到产耐热果胶裂解酶的结构基因pel9A,并将其克隆于表达载体pET28a中,最后将此重组质粒转化到受体菌E.coli BL-21中进行表达.诱导条件为:37 ℃诱导5 h,IPTG浓度为0.8 mmol/L.重组菌经IPTG诱导和SDS-PAGE分析表达的蛋白质的相对分子质量为130 000,与预期相对分子质量相符.细胞经超声破碎后,测得果胶酶的比酶活为15 U/mg粗蛋白.

作 者： 甄东晓 王树英 严群 李华钟 ZHEN Dong-xiao WANG Shu-ying YAN Qun LI Hua-zhong   作者单位： 甄东晓,严群,ZHEN Dong-xiao,YAN Qun(江南大学,工业生物技术教育部重点实验室,江苏,无锡,214036)

王树英,WANG Shu-ying(江南大学,分析测试中心,江苏,无锡,214036)

李华钟,LI Hua-zhong(江南大学,工业生物技术教育部重点实验室,江苏,无锡,214036;江南大学,医学系,江苏,无锡,214036) 

刊 名： 食品与生物技术学报  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF FOOD SCIENCE AND BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2006 25(3)  分类号： Q557  关键词： 果胶裂解酶   耐热梭状芽孢杆菌   重组质粒   大肠杆菌BL-21   表达  

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