小鼠睫状神经营养因子基因的克隆及真核表达载体的构建
目的:分别构建野生型和截短型小鼠睫状神经营养因子(CNTF)基因的真核表达载体.方法:通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增小鼠CNTF野生型全长编码序列,体外定点突变获取截短型CNTF的互补DNA(cDNA)编码序列,将上述两序列分别克隆至pGEM-TEasy载体,经限制性内切酶EcoRⅠ和XbaⅠ双酶切后,将野生型和截短型CNTF基因连入pTracer-CMV真核表达载体,DNA测序鉴定.结果:PCR成功扩增了野生型和截短型CNTF基因,DNA序列分析证实两种真核表达载体中的CNTF序列与Gene Bank中目的序列一致.结论:野生型和截短型CNTF基因真核表达载体的成功构建为视网膜色素变性(RP)的基因治疗研究奠定了基础.
作 者： 袁松涛 左爱军 李宁东 梁东春 赵堪兴 YUAN Songtao ZUO Aijun LI Ningdong LIANG Dongchun ZHAO Kanxing 作者单位： 袁松涛,YUAN Songtao(300070,天津医科大学;天津市眼科医院)左爱军,梁东春,ZUO Aijun,LIANG Dongchun(天津市内分泌研究所)
李宁东,LI Ningdong(天津市眼科医院)
赵堪兴,ZHAO Kanxing(300070,天津医科大学)
刊 名： 天津医药 ISTIC PKU 英文刊名： TIANJIN MEDICAL JOURNAL 年，卷(期)： 2006 34(7) 分类号： Q3 关键词： 睫状神经营养因子 基因克隆 真核表达载体 视网膜色素变性 小鼠