抗菌肽Dermaseptin S4及其突变体基因在大肠杆菌中的表达
目的 构建表达抗菌肽Dermaseptin S4(DS4)及其突变体K4-S4的工程菌,并表达目的 蛋白.方法 采用重叠延伸PCR法设计和扩增抗菌肽DS4及K4-S4基因,定向克隆入载体pUC-18中,经酶切、测序鉴定,重组至表达载体pGEX-4T-1中,构建抗菌肽DS4及K4-S4基因表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)plyS,经IPTG诱导表达,12%SDS-PAGE鉴定.结果 构建的抗菌肽DS4及K4-S4基因工程菌所表达的目的 蛋白,经SDS-PAGE鉴定可见相对分子质量34 000的特异性目的 条带,37℃诱导5 h的蛋白表达量最高,且多数以包涵体形式存在.结论 已成功构建抗菌肽DS4及K4-S4工程菌,并表达目的 蛋白,为进一步研究其功能和应用奠定了基础.
作 者： 张庆华 韩跃武 谢俊秋 卢天龙 任惠子 冯惟萍 作者单位： 兰州大学基础医学院生物化学与分子生物学研究所,兰州,730000 刊 名： 中国生物制品学杂志 ISTIC 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS 年，卷(期)： 2008 21(4) 分类号： Q78 关键词： 抗菌肽 Dermaseptin S4 突变体 大肠杆菌 表达