一种产邻苯二酚菌株高通量筛选方法
目的:对产邻苯二酚菌株进行筛选.方法:采用前期筛得的产邻苯二酚菌为出发菌株,通过硫酸二乙酯诱变的方法使该菌株突变,同时建立96孔板培养和酶标仪检测方法对产邻苯二酚菌株进行高通量筛选.结果:硫酸二乙酯的终浓度为0.1%,诱变时间为8 min的条件下,突变菌致死率为84.5%,突变效果最好.筛选培养基中吸光值(495nm)和富集培养基中菌液浊度值(OD_(630))的加和值较大的突变菌株产邻苯二酚能力高.通过诱变和筛选得到的菌株,产邻苯二酚浓度可达0.87mg/ml,比出发菌株的提高了262.5%.经过形态学和生理生化反应,初步鉴定该菌株属于假单胞菌属(Pseudomonas sp.).结论:硫酸二乙酯诱变和96孔板筛选的方法能以高通量方式快速筛选出产邻苯二酚菌株.
作 者: 王永泽 李亨芬 王金华 陈雄 李冬生 周宝晗 WANG Yong-ze LI Heng-fen WANG Jin-hua CHEN Xiong U Dong-sheng ZHOU Bao-han 作者单位: 王永泽,王金华,陈雄,李冬生,WANG Yong-ze,WANG Jin-hua,CHEN Xiong,U Dong-sheng(湖北工业大学,发酵工程省部共建教育部重点实验室,湖北武汉,430068)李亨芬,LI Heng-fen(湖北工业大学,发酵工程省部共建教育部重点实验室,湖北武汉,430068;华侨大学分子药物学研究所,福建泉州,362021)
周宝晗,ZHOU Bao-han(湖北工业大学化学与环境工程学院,湖北武汉,430068)
刊 名: 生物技术 PKU 英文刊名: BIOTECHNOLOGY 年,卷(期): 2009 19(6) 分类号: O815 关键词: 邻苯二酚 高通量筛选 化学诱变 catechol high throughput screen chemical mutation