人基质蛋白酶2(MMP-2)类血红素结构域原核表达优化
用构建的人基质蛋白酶-2(MMP-2)类血红素结构域原核表达载体PET25b-PEX转化大肠杆菌BL21(DE3),筛选阳性菌落LB液体培养基培养,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达产生的表达蛋白,大小约29 kD,与预期大小相符.设置不同的IPTG诱导终浓度,诱导时间,诱导时菌液OD值和LB液体培养基的pH值,SDS-PAGE电泳和软件分析发现,当IPTG浓度为0.7 mmol/L,诱导4 h,诱导时菌液OD值为0.7时,实验能获得最高的PEX蛋白表达;5 L大规模培养时,LB培养基pH值为7.5时,可获得较高的重组PEX蛋白表达.
作 者： 李彦杰 王保莉 张守涛 郭蔼光 LI Yan-jie WANG Bao-li ZHANG Shou-tao GUO Ai-guang 作者单位： 西北农林科技大学生命科学学院,陕西杨凌,712100 刊 名： 西北农业学报 ISTIC PKU 英文刊名： ACTA AGRICULTURAE BOREALI-OCCIDENTALIS SINICA 年，卷(期)： 2006 15(2) 分类号： Q786 关键词： 人基质金属蛋白酶-2 类血红素结构域 抑制血管生成 优化表达