人冠状病毒NL63核壳蛋白和棘突蛋白的表达及其在血清学检测中的初步应用
目的:重组表达人冠状病毒NL63(HCoV-NL63)的核壳蛋白(N蛋白)及棘突蛋白(S蛋白),用于检测血清中的相应抗体.方法:用原核表达系统表达HCoV-NL63的N蛋白,建立检测N抗体的Werstern印迹法;用真核表达系统表达HCoV-NL63的S蛋白,建立检测S抗体的间接免疫荧光(IFA)法.结果:经Werstern印迹检测,重组S蛋白和N蛋白表达正确;初步建立了N蛋白纯化方法.利用建立的检测方法,检测了100份正常成人血清,总阳性率为81%.其中S抗体阳性率为66%,N抗体阳性率为38%,S抗体和N抗体均为阳性的占总数的22%,双抗体均为阴性的占总数的19%;S抗体的检出率明显高于N抗体.结论:重组HCoV-NL63 N蛋白及S蛋白表达成功;S抗体和N抗体共同检测可获得较好的检测结果,减少漏检.
作 者： 周为民 张陵林 陆柔剑 王慧娟 谭文杰 阮力 ZHOU Wei-Min ZHANG Lin-Ling LU Rou-Jian WANG Hui-Juan TAN Wen-Jie RUAN Li 作者单位： 中国疾病预防控制中心,病毒病预防控制所,北京,100052 刊 名： 生物技术通讯 ISTIC 英文刊名： LETTERS IN BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)： 2010 21(2) 分类号： Q78 R392 关键词： 人冠状病毒NL63 核壳蛋白 棘突蛋白 表达 血清学检测