汉滩病毒G1S0.7嵌合基因重组腺病毒的构建及鉴定
目的在本室前期工作的基础上构建汉滩病毒M基因G1片段与S基因0.7kb片段嵌合基因的重组腺病毒.方法构建含有汉滩病毒G1S0.7嵌合基因的转移载体pShuttle-G1S0.7,然后通过特异性的酶切将嵌合基因与腺病毒DNA相连,电转化E.coli JM109,获得重组腺病毒Adeno-G1S0.7 DNA,转染HEK293细胞得到重组腺病毒.进一步对重组腺病毒的滴度和表达产物进行鉴定.结果构建的含G1S0.7嵌合基因的重组腺病毒,滴度可达1013~1015PFU/L;该重组腺病毒感染Vero-E6细胞后,表达出可被抗汉滩病毒核蛋白及糖蛋白G1的特异性单抗(mAb)所识别的融合蛋白.结论利用腺病毒表达系统,成功地表达同时具有核蛋白及糖蛋白G1生物学活性的融合蛋白,为进一步研究其免疫学特性奠定了基础.
作 者: 张芳琳 刘勇 于澜 胡刚 吴兴安 史梦远 白文涛 王海涛 徐志凯 ZHANG Fang-lin LIU Yong YU Lan HU Gang WU Xing-an SHI Meng-yuan BAI Wen-tao WANG Hai-tao XU Zhi-kai 作者单位: 第四军医大学微生物学教研室,西安,710032 刊 名: 免疫学杂志 ISTIC PKU 英文刊名: IMMUNOLOGICAL JOURNAL 年,卷(期): 2006 22(2) 分类号: Q78 关键词: 汉滩病毒 嵌合基因 重组腺病毒