家蝇防御素defensin cDNA的克隆及在毕赤酵母中的表达
提取家蝇总RNA,RT-PCR扩增编码家蝇防御素defensin的cDNA,克隆并测定了其序列,将该cDNA序列与酵母表达载体pPICZαA重组,构建酵母分泌型表达载体pPICZα-de,电激法转化毕赤酵母(Pichia pastoris)受体菌GS115.经表型筛选和PCR鉴定证明目的片段已稳定整合到酵母染色体基因组中.在含不同浓度的Zeocin平板上筛选到高拷贝整合的转化子,阳性克隆经甲醇诱导表达,用Tricine-SDS-PAGE确定了表达产物的正确性,琼脂孔穴平板扩散法、比浊法测定了表达产物的活性,对金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus具有一定的杀菌活性.
作 者： 金丰良 许小霞 赵士炜 古德祥 张文庆 JIN Feng-liang XU Xiao-xia ZHAO Shi-wei GU De-xiang ZHANG Wen-qing 作者单位： 中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室,广东,广州,510275 刊 名： 中山大学学报（自然科学版） ISTIC PKU 英文刊名： ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS SUNYATSENI 年，卷(期)： 2006 45(3) 分类号： Q78 关键词： 家蝇 防御素 毕赤酵母 诱导表达 活性测定