野生型金黄色葡萄球菌肠毒素C2在E. Coli中的表达和纯化研究
目的 克隆金黄色葡萄球菌肠毒素C2(SEC2)基因在E.coli重组表达,纯化重组SEC2(rSEC2)并进行生物学活性分析.方法 PCR获得正确编码SEC2的基因片断,构建表达质粒pET -28a-sec2在E.coli BL21中表达.利用离子交换和分子筛色谱纯化rSEC2,四甲基偶氮唑盐(MTT)法对rSEC2和天然SEC2(nSEC2)生物学活性进行分析和比较.结果 可溶性rSEC2占菌体总蛋白质的40%,两步纯化后蛋白质纯度约达9 5%,rSEC2和nSEC2均具有显著的超抗原活性.结论 成功获得与nSEC2有着类似活性的高纯度rSEC2,为进一步研究该蛋白质的抗肿瘤机理奠定物质基础.
作 者: 马凤森 应跃斌 陈枢青 MA Feng-sen YING Yue-bin CHEN Shu-qing 作者单位: 马凤森,MA Feng-sen(杭州国光药业有限公司,浙江,杭州,310018)应跃斌,陈枢青,YING Yue-bin,CHEN Shu-qing(浙江大学,药学院,生物制药研究室,浙江,杭州,310031)
刊 名: 中国生化药物杂志 ISTIC PKU 英文刊名: CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMICAL PHARMACEUTICS 年,卷(期): 2006 27(5) 分类号: Q786 关键词: 肠毒素 超抗原 克隆表达 阴离子交换色谱 分子筛色谱 四甲基偶氮唑盐法 生物学活性