抗HBsAg单链抗体特异性单克隆抗体的制备及应用
目的 获得抗HBsAg单链抗体 (HBScFv)的单克隆抗体,并初步研究其在抗HBsAg类小分子抗体及其融合蛋白质的纯化、活性鉴定方面的应用.方法 利用杂交瘤技术,以大肠杆菌表达的重组抗HBScFv为抗原,免疫Balb/c小鼠,再将小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行细胞融合.通过ELISA法、Western-blot鉴定特异性单克隆抗体,通过免疫双扩散法鉴定单抗亚型,并将筛选到的高效价单抗用于抗HBsAg Fab抗体等重组蛋白质的亲和色谱及ELISA鉴定.结果 建立了9株能够稳定分泌抗HBScFv特异性单克隆抗体的细胞株,其细胞上清效价为1:160～1:12 800,腹水效价为1:50 000～1:400 000;单克隆抗体的亚类分析结果显示有6株为IgG1,其余3株为IgG2a.初步应用结果 表明制备的单克隆抗体14F7可用于抗HBsAg Fab抗体等重组蛋白质的亲和色谱及活性鉴定.结论 成功建立了能够稳定分泌HBScFv特异性单克隆抗体的细胞株.
作 者： 陈文吟 饶桂荣 任向荣 郑业华 粟宽源 CHEN Wen-yin RAO Gui-rong REN Xiang-rong ZHENG Ye-hua SU Kuan-yuan 作者单位： 空军广州医院,肝病研究所,广东,广州,510602 刊 名： 中国生化药物杂志 ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMICAL PHARMACEUTICS 年，卷(期)： 2006 27(5) 分类号： Q785 关键词： 抗HBsAg单链抗体 单克隆抗体 制备