胸腺素α原基因的克隆及在大肠杆菌中的融合表达
胸腺素α原(ProTα)作为一种免疫增强剂,对各种免疫缺陷疾病、病毒感染以及肿瘤都具有一定的作用.此外ProTα可以作为核蛋白参与细胞增殖,在肿瘤的预测、诊断及治疗中有一定应用.根据人胸腺素α原已发表的核苷酸序列,设计了一对特异性引物(P1/P2),应用RT-PCR法从中国人外周血中克隆到ProTα基因,将扩增产物连接到pMD18-T载体中并转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性重组质粒进行序列测定;同时用EcoRI和BamHI双酶切PCR产物,将该基因片断插入经同样双酶切的质粒pGEX 6P-1中,转化大肠杆菌BL21中进行表达.结果表明,克隆到的ProTα基因与参考的氨基酸同源性为99.70%;原核表达产物经过SDS-PAGE电泳分析,融合蛋白分子量为37 ku,主要以可溶形式存在.
作 者： 李俊燕 周克夫 LI Jun-yan ZHOU Ke-fu 作者单位： 厦门大学生命科学学院,细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室,福建,厦门,361005 刊 名： 厦门大学学报（自然科学版） ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF XIAMEN UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE) 年，卷(期)： 2006 45(5) 分类号： Q786 关键词： 胸腺素α原 克隆 融合表达