尖吻蝮蛇毒碱性磷脂酶A2的表达及其生化特征
将尖吻蝮蛇毒碱性磷脂酶A2(A.aBPLA2)基因克隆至温敏表达载体pBLMVL2,在大肠杆菌RR1中成功诱导表达.表达产物A.aBPLA2约占细菌蛋白质总量的20%,并以包涵体的形式存在.纯化包涵体后,将产物变性、复性,然后用FPLC SuperoseTM12纯化,产物经过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测只有单一条带.对纯化后的表达A.aBPLA2进行了酶活性、抑制血小板聚集活性和溶血活性的测定.结果显示,表达A.aBPLA2的酶活性与变性后复性江浙蝮蛇酸性磷脂酶A2酶活性相近,具有类似变性后复性江浙蝮蛇碱性磷脂酶A2的溶血活性,没有抑制血小板聚集活性.最后对磷脂酶A2的结构与这些活性的关系进行了讨论.
作 者： 刘小龙 钟晓燕 吴祥甫 周元聪 LIU Xiao-Long ZHONG Xiao-Yan WU Xiang-Fu ZHOU Yuan-Cong 作者单位： 中国科学院上海生物化学研究所,上海,200031 刊 名： 生物化学与生物物理进展 ISTIC SCI PKU 英文刊名： PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS 年，卷(期)： 2000 27(3) 分类号： Q556 Q545 关键词： 尖吻蝮蛇碱性磷脂酶A2 表达 活性测定 结构 功能