菜心基因组DNA提取及RAPD反应体系的优化
用改良的CTAB法提取菜心基因组DNA,并利用紫外分光光度法测定其纯度和含量,用琼脂糖凝胶电泳法检测DNA的降解状况和纯度.结果表明:此法提取的DNA具有典型的天然DNA分子的标准紫外吸收光谱特点,且适于进行RAPD分析.RAPD分析的优化反应体系为:25μL的反应液中含有0.8 U的Taq酶,0.28 μmol/Lprimer,30 ng的DNA,2.0 mmol/L Mg2+,0.20 mmol/L dNTPs.PCR扩增循环为94℃、5 min;94℃、1 min;36℃、1 min; 72℃、2 min,37个循环;72℃延伸10 min.
作 者: 王丽 乔爱民 孙一铭 孙敏 WANG Li QIAO Ai-min SUN Yi-ming SUN Min 作者单位: 王丽,WANG Li(西南大学,生命科学学院,重庆,400715;仲恺农业技术学院,园艺系,广州,510225)乔爱民,QIAO Ai-min(仲恺农业技术学院,园艺系,广州,510225)
孙一铭,孙敏,SUN Yi-ming,SUN Min(西南大学,生命科学学院,重庆,400715)
刊 名: 西南师范大学学报(自然科学版) ISTIC PKU 英文刊名: JOURNAL OF SOUTHWEST CHINA NORMAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION) 年,卷(期): 2006 31(2) 分类号: Q946 关键词: 菜心 基因组DNA 改良CTAB法 DNA分子标记技术