斑马鱼促性腺激素释放激素基因的克隆与表达
目的 克隆斑马鱼促性腺激素释放激素(GnRH)基因,构建重组质粒pQE30-GnRH并获得表达蛋白.方法 从斑马鱼脑组织提取总RNA,应用RT-PCR方法获得斑马鱼GnRH cDNA.将该cDNA插入质粒pQE30中,并使其在大肠杆菌RB791中表达.经IPTG诱导后SDS-PAGE电泳检测蛋白的表达情况.结果 斑马鱼GnRH cDNA长为207bp,编码的GnRH前体为69个氨基酸残基.与鲤鱼、鲫鱼、拟鲤、黑头软口鲦等淡水鲤科鱼类的氨基酸序列同源性比较,分别为74.4%,69.8%,73.3% 和 73.3%.电泳结果显示一新的分子量约为14.4 kDa的特异蛋白带.结论 本研究所克隆的斑马鱼GnRH基因属于GnRH-Ⅱ.构建斑马鱼GnRH原核表达质粒不仅获得大量的GnRH蛋白,还可对该蛋白做进一步分离纯化以及生物活性方面的研究.
藤原滋树,Shigeki Fujiwara(日本高知大学理学部)
刊 名： 青海医学院学报 英文刊名： JOURNAL OF QINGHAI MEDICAL COLLEGE 年，卷(期)： 2009 30(1) 分类号： Q78 关键词： 斑马鱼 促性腺激素释放激素 克隆 基因表达