采用反向遗传学技术构建H5亚型禽流感疫苗株
目的 构建重组H5亚型禽流感疫苗株.方法 采用RT-PCR技术,分别扩增鹅源高产禽流感病毒A/Goose/Dalian/3/01(H9N2)的6条内部基因片段、高致病性禽流感病毒株A/Goose/HLJ/ QFY/04(H5N1)的血凝素(HA)基因和N3亚型参考株A/Duck/Germany/1215/73(H2N3)的神经氨酸酶(NA)基因,并对HA1和HA2连接肽处的5个碱性氨基酸(R-R-R-K-K)的编码序列进行缺失与修饰,然后分别构建这8个基因的转录与表达载体,将其共转染293T/MDCK混合培养细胞单层,对拯救出的重组病毒进行表型分析.结果 利用反向遗传学技术拯救出了全部基因都源于禽流感病毒的疫苗株,其基因序列符合设计要求包括删除HA基因的毒力相关序列,疫苗株的表型为H5N3.结论 构建成功重组禽流感疫苗株rH5N3,为制备H5亚型禽流感疫苗打下了坚实的基础.
刘明,刘春志,童光志,LIU Ming,LIU Chun-zhi,TONG Guang-zhi(中国农业科学院哈尔滨畜医研究所,畜医生物技术国家重点实验室,哈尔滨,150001)
刊 名： 免疫学杂志 ISTIC PKU 英文刊名： IMMUNOLOGICAL JOURNAL 年，卷(期)： 2006 22(5) 分类号： Q78 关键词： 禽流感病毒 反向遗传学 疫苗株