用Red/ET重组酶构建基因打靶载体
基因敲除的小鼠模型是研究基因功能的一种重要资源.采用常规分子克隆的方法建立基因敲除的打靶载体存在构建效率低和难以获得长片段同源臂的缺点.因此快速高效地构建打靶载体,已成为获得特定基因敲除动物模型的关键环节.为研究Resp18未知功能分泌肽基因,应用一种新的DNA工程平台--Red/ET同源重组技术来构建其打靶载体,并比较了这一方法在构建不同长度同源臂中的效率.研究表明,Red/ET重组方法构建打靶载体具有很高的效率,可以获得较长的同源臂,并且不会引入突变,有助于获得更高的打靶效率.因此Red/ET重组为构建打靶载体提供了一种新的可靠的方法.
作 者： 杨建岭 顾淑萍 陈臣 王铸钢 许燕 费俭 YANG Jian-Ling GU Shu-Ping CHEN Chen WANG Zhu-Gang XU Yan FEI Jian 作者单位： 杨建岭,许燕,YANG Jian-Ling,XU Yan(上海师范大学生命与环境科学学院,上海,200234)顾淑萍,陈臣,王铸钢,费俭,GU Shu-Ping,CHEN Chen,WANG Zhu-Gang,FEI Jian(上海南方模式生物研究中心,上海,201203)
刊 名： 生物工程学报 ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)： 2006 22(6) 分类号： Q782 关键词： Red/ET重组 基因打靶 载体