胆固醇氧化酶基因的克隆及在E.coli中的表达
根据NCBI中报道的Brevibacterium sterolicum ATCC21387胆固醇氧化酶基因序列,采用PCR方法以Brevibacterium sp.DGCDC-82的基因组为模板,扩增得到了编码胆固醇氧化酶的基因,该基因与来源于Brevibacterium sterolicum ATCC21387的胆固醇氧化酶基因(choB)同源性为98%.将得到的基因定向克隆到pET28a载体中,转化至含有编码argU和proL基因的大肠杆菌BL21-CodonPlus(DE3)-RP中表达.经过IPTG诱导后,经SDS-PAGE检测在约55kD处有一蛋白表达条带,目的蛋白表达量约占总蛋白的16%,经测定酶活为340U/L.
作 者： 王龙刚 邬敏辰 王武 WANG Long-Gang WU Min-Chen WANG Wu 作者单位： 江南大学工业生物技术教育部重点实验室,无锡,214036 刊 名： 微生物学通报 ISTIC PKU 英文刊名： MICROBIOLOGY 年，卷(期)： 2006 33(6) 分类号： Q93 关键词： Brevibacterium sp.DGCDC-82 胆固醇氧化酶 克隆 原核表达