TAT-PTD融合蛋白可能存在的跨膜递送作用机制
为探讨TAT-PTD融合蛋白的跨膜递送作用机制,采用DNA重组技术构建pGEX-TAT-GFP表达质粒.在E.coli BL21表达GST-TAT-GFP,并用谷胱甘肽(glutathione)-Sepharose-4B亲和柱进行纯化.GST-TAT-GFP在不同条件下与细胞的作用结果表明,GST-TAT-GFP能有效进入HeLa、SMMC-7721、L-02和BEL-7402细胞,GST-TAT-GFP在递送时对时间和浓度有依赖关系.同时,温度对GST-TAT-GFP跨膜作用具有明显的影响,GST-TAT-GFP的跨膜作用受代谢抑制剂的影响很小,肝素的存在能明显抑制GST-TAT-GFP跨膜进入细胞的能力,GST-TAT-GFP对细胞活性没有影响.这些结果说明,TAT-PTD可能是通过与细胞表面的硫酸乙酰肝素等受体相结合介导融合蛋白跨膜递送进入细胞的.
作 者： 何火聪 刘树滔 潘剑茹 傅蓉 陈菁 陈躬瑞 饶平凡 HE Huo-Cong LIU Shu-Tao PAN Jian-Ru FU Rong CHEN Jing CHEN Gong-Rui RAO Ping-Fan 作者单位： 何火聪,HE Huo-Cong(福州大学生物工程研究所,福州,350002;福建省肿瘤医院放射生物学研究室,福州,350014)刘树滔,潘剑茹,傅蓉,陈菁,陈躬瑞,饶平凡,LIU Shu-Tao,PAN Jian-Ru,FU Rong,CHEN Jing,CHEN Gong-Rui,RAO Ping-Fan(福州大学生物工程研究所,福州,350002)
刊 名： 中国生物化学与分子生物学报 ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY 年，卷(期)： 2006 22(9) 分类号： Q78 关键词： TAT-PTD 跨膜递送 GST-TAT-GFP